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基因擴增儀與DNA復制的基本要素是一致的
更新時間:2022-08-26   點擊次數:1770次
   基因擴增儀是分子生物學研究重要的工具,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術。該儀器是由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成的,主要用于科研及臨床的基因擴增、定性PCR基因擴增、熒光/酶免終點定量DNA基因擴增、基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增等。
 
  基因擴增的原理是雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶的作用下,以單鏈為模版,根據堿基互補配對原則復制成新的單鏈,與模版配對成為雙鏈分子挎貝。在體外實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。
 
  基因擴增的基本要素與DNA復制的基本要素是一致的。
 
  1、DNA模板:待拷貝的DNA稱為模板,它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA,然后擴增得到的產物是雙鏈狀態的。
 
  2、引物:是DNA復制的先鋒,就象結晶過程中的晶核,引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
 
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA復制的動力,在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
 
  4、緩沖液:提供DNA合成反應所需的pH,離子強度等環境。
 
  5、4種單核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
 
  它可以在試管里建立反應,經過數小時之后,就能將微量的目的基因或者某一特定的DNA片段擴增數十萬倍,乃至千百萬倍,而無需通過繁瑣費時的基因克隆程序,便可獲得足夠數量的精確的DNA拷貝,所以有人亦稱之為無細胞的分子克隆法。
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